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核心試劑:巴豆油鑒別試液、無(wú)水乙醇
輔助工具:潔凈試管(2 支)、移液管 / 滴管、恒溫水浴鍋(或 40~50℃溫水燒杯)、記號(hào)筆
試液準(zhǔn)備:取 1 支潔凈試管,加入 3mL 巴豆油鑒別試液,做好標(biāo)記備用。
油樣處理:取另一支試管,注入 1mL 待檢油樣,再加入 5mL 無(wú)水乙醇,充分振蕩混勻,使油樣與乙醇充分溶解。
分層反應(yīng):將溶解好的油樣 - 乙醇混合液,沿盛有鑒別試液的試管壁緩慢滴加,避免兩液劇烈混合,靜置后觀察試管內(nèi)會(huì)形成明顯的上下兩層液體。
恒溫加熱:將試管放入 40~50℃的溫水中,水浴加熱 30 分鐘,期間保持水溫穩(wěn)定,避免試管晃動(dòng)。
陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn):同時(shí)取已知巴豆油樣品,按上述相同步驟操作,作為陽(yáng)性對(duì)照,便于結(jié)果比對(duì)確證。
陽(yáng)性結(jié)果:若兩液界面處出現(xiàn)紅棕色環(huán),提示樣品中含有巴豆油;根據(jù)巴豆油摻入量不同,色環(huán)顏色會(huì)從紅棕色逐漸加深至棕黑色,摻入量越高,顏色越深。
陰性結(jié)果:若兩液界面處無(wú)明顯色環(huán),或僅出現(xiàn)極淡的無(wú)色透明環(huán),判定為陰性,樣品中未檢出巴豆油。
干擾區(qū)分:棉子油、菜子油、豆油等常見(jiàn)食用油,偶爾會(huì)在界面處產(chǎn)生淡紅色環(huán),但顏色淺淡,與巴豆油的紅棕色環(huán)差異顯著,極易肉眼區(qū)分。
檢出限說(shuō)明:本方法檢出限為2.5%,即樣品中巴豆油摻入量≥2.5% 時(shí),才可穩(wěn)定出現(xiàn)特征色環(huán);低于此濃度可能出現(xiàn)假陰性,需送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步檢測(cè)。
操作細(xì)節(jié):滴加油樣 - 乙醇混合液時(shí),務(wù)必沿試管壁緩慢操作,確保兩液分層清晰,否則會(huì)因混合不均導(dǎo)致色環(huán)模糊,影響結(jié)果判斷。
溫度控制:水浴溫度需嚴(yán)格控制在 40~50℃,溫度過(guò)高會(huì)破壞試劑活性,溫度過(guò)低則反應(yīng)速率過(guò)慢,均會(huì)導(dǎo)致顯色失敗。
結(jié)果時(shí)效性:加熱完成后需立即觀察結(jié)果,放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)因兩液擴(kuò)散混合,導(dǎo)致色環(huán)逐漸消失。